生物显微镜是观察和研究细胞和组织的重要仪器。生物显微镜按其性能可分为普通光学显微镜和高精度电子显微镜。在解剖学实验中,主要介绍了普通光学显微镜。光学显微镜是观察人体细微结构的常规仪器。了解和掌握显微镜的结构和使用方法是学习人体形态和结构的有效方法之一。通过显微镜可以观察到细胞的基本结构和人体各种组织器官的精细结构,让学习者更直观地掌握人体的结构和功能,促进其他课程的学习。
原则
1.成像:从外部入射的光被反射镜向上发射,或者内部光源发出的光被聚光器聚光在标本上,使标本有足够的光照。被样品反射或折射的光通过物镜进入光轴与水平面成45度倾斜的棱镜,在目镜的视场光阑处变成放大的实像。这个实像被目镜放大成虚像,所以人们看到的是虚像。
2.放大倍数:生物显微镜目镜和物镜放大的标本总放大倍数是显微镜和目镜放大倍数的乘积。
3.分辨率:对于显微镜来说,分辨率都是重要的性能参数。光学生物显微镜的分辨率d与光波波长γ、物镜角度α和介质折射率n有关。因此,在光学显微镜中,γ越短,N和α越大,D值越低,分辨率越高。一般α的大值可以达到140度,空气中n=1,可见光的短波长为450 mm,因此根据不同的α和γ,可以得到不同的分辨率来观察样品。常见的光学显微镜大分辨率为0.2μm(即两个粒子之间的小距离为0.2μm),大放大倍数可达1000~1500倍。其他显微镜也是在此基础上发展起来的。
4.样品要求:普通光学生物显微镜利用样品的光吸收形成对比度和颜色变化进行观察,因此对样品要求较高。观察的样品通常用固定剂固定,包埋剂包埋,然后切成厚度约5μm的薄片,染色后才能观察到,而活细胞或未染色的细胞则无法观察到。
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